當前所在頁面：一、為什么劃不出單個菌落？
1、平板上有過多的水分；
2、在劃線時沒有反復灼燒接種環；
3、多區劃線，三區或四區劃線，越是稀釋到4區，間距要越寬。
二、培養基配制時應注意的問題
1、嚴格控制滅菌溫度，需要按照要求進行滅菌操作。如果培養基的含糖量較高，那么滅菌溫度就不能太高，否則就會使糖分焦化，從而影響培養基的質量。
2、不能反復融化瓊脂培養基，這會對培養基中的營養成分產生破壞。
3、不能對培養基進行反復滅菌，這同樣也會對營養成分產生破壞作用。
4、在對瓊脂培養基進行滅菌后需要將其充分搖勻。
5、需要將培養基完全溶解才能分裝培養基。
三、培養基的保存
1、平板：大多數平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。
2、干粉培養基：避光干燥，結塊后不能使用。
3、亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時，要常溫解凍，不能使用水浴加熱。
4、抗生素類：冷藏保存，溫度過高會導致靈敏度的下降。
5、兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結果。
四、觀察時間的掌握
按SN、GB等標準或培養基的使用說明所述時間進行觀察，時間過短或時間過長，單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養基，時間短單菌落看不到卵磷脂環，時間長綿羊李氏菌也會產生沉淀環。OXA、PALCAM的觀察也如此，時間過長，李氏菌使整個平板成黑色，不利于觀察單個菌落。霉菌要3天后要及時觀察計數，防止時間長成一片。
五、添加劑的添加
1、溫度的掌握:卵黃和抗生素類添加的溫度都不應太高。
2、定量: 過多會抑制一些目標菌，太少又導致雜菌的過度生長。
六、培養溫度的掌握
1、真菌類：25-28℃培養
2、細菌類：李氏菌在增菌和生化中要求培養溫度在30℃左右。
3、其他一般在36℃左右
七、常用的接種方法
穿刺接種、傾注接種、涂布接種、劃線接種。
