微生物的實驗可以分為兩大部分:前期準備和樣品檢驗。
事實上,保持整個實驗室清潔是非常重要的,這樣就不用在滅菌前擔心太多了,然而滅菌后必須保證樣品或者培養基免受污染。其實,可以把滅菌想像成”一扇門”,在培養基中或者一些設備比如吸管的微生物都在滅菌過程中被殺死了,沒有微生物困擾實驗了。必須保證滅菌后的環境(門后的部分)的潔凈,杜絕滅菌后的培養基和設備受到污染。
一、無菌的重要性
1、無菌技術——高壓濕熱滅菌
2、無菌技術——過濾 (Filtration)
3、無菌過程注意點
4、實驗的無菌技術注意點
二、從微生物的實驗室布局角度
一個設計合理的實驗室能提供一個合格的環境以支持實驗能夠安全有效地進行。首先,需要為實驗室選擇一個合適的物理位置:
遠離其他操作區域,比如,生產或者儲運;
沒有從其他區域進入實驗室的直接入口;
實驗室必須是微生物實驗專用;
應有專門微生物檢測無菌間,并通過緩沖間與準備間等進行區隔。
三、遵照GLP相關的安全規則
1.GLP要點——工作區域
2、GLP要點——潔凈工作臺
四、一個有效的實驗室
五、微生物防護用具
1、一級防護(設備)
①移液輔助器,如移液器
②生物安全柜
③一次性塑料接種環、電熱接種環
④螺口蓋試管及瓶子
⑤高壓滅菌器
⑥一次性塑料移液管
2、二級防護(人員)
①工作服、防護服
②手套(乳膠手套等)
③安全眼鏡、面罩或其他防護用品
六、檢測中常見問題解答
細菌和霉菌培養箱必須分開放置嗎?
在CNAS-CL09:2013《檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領域的應用說明 》有此規定:5.3.3 e)檢測樣品中的霉菌時,要有適當的措施控制孢子在空氣中的擴散。但未見到明確規定細菌培養箱和霉菌培養箱不能在同一房間的規定。一般實驗室都有三種培養箱,結構設計上分為兩種,一種是內部循環風溫度平衡的,第二種是內外熱空氣流動自動平衡型的,另外第三種是熱輻射溫度平衡型的。有網友認為,第一種和第三種應該可以放在一個實驗室,保持一定距離即可。第二種培養箱應該不能放在一個實驗室。據說,CNAS現場評審,會提出細菌和霉菌培養箱分開放置要求。